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如何選擇細(xì)菌接種方法?

更新時間:2015-08-05點擊次數(shù):1589

如何選擇細(xì)菌接種方法?

細(xì)菌的接種方法有很多種,如劃線法、涂布法、傾注法、斜面接種法、液體培養(yǎng)基接種法、螺旋接種法等,其方法和應(yīng)用各有不同,下面進行解釋以幫助實驗人員選擇操作。

劃線法:此法主要用于菌種分純,獲得單菌落
由接種環(huán)沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線,微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少,并逐步分散開來,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經(jīng)培養(yǎng)后,可在平板表面得到單菌落。
優(yōu)點:可以觀察菌落特征,對混合菌進行分離。
缺點:不能用于菌落計數(shù)。

涂布法:此法主要用于菌落總數(shù)計數(shù)
先將培養(yǎng)基熔化后趁熱倒入無菌平板中,然后用無菌吸管吸取0.1ml菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無菌L型玻璃棒將菌液在平板上涂抹均勻,將涂抹好的平板平放于桌上20~30min,使菌液滲透入培養(yǎng)基內(nèi),然后將平板倒轉(zhuǎn),保溫培養(yǎng),至長出菌落后即可計數(shù)。
優(yōu)點:可以計數(shù),可以觀察菌落特征。
缺點:接種前需梯度稀釋,吸收量較少,較麻煩,平板不干燥效果不好,容易蔓延。

傾倒法:此法主要用于菌落總數(shù)的計數(shù)
吸取1ml菌液加入平板中,倒入已融化并冷卻至45~50℃的細(xì)菌培養(yǎng)基,輕輕轉(zhuǎn)動平板,使菌液與培養(yǎng)基混合均勻,冷疑后倒置,適溫培養(yǎng)。至長出菌落后即可計數(shù)。
優(yōu)點:可以計數(shù),較方便。
缺點:接種前需梯度稀釋,不能觀察菌落特征,不適用于嚴(yán)格好氧菌和熱敏感菌。

斜面接種法:此法主要用于保存菌種,或觀察細(xì)菌的某些生化特性和動力
用接種環(huán)或接種針伸入菌種管內(nèi),挑取用來移種的菌落。伸入斜面培養(yǎng)管內(nèi),先從斜面底部到頂端拖一條接種線,再自下而上蜿蜒劃線,或直接自下而上地蜿蜒劃線。接種完成之后,用火焰滅菌培養(yǎng)管口,并塞上棉塞,置于37℃培養(yǎng)。

液體培養(yǎng)基接種法:此法主要用于菌液比濁實驗
用滅菌接種環(huán)挑取菌落或標(biāo)本,在試管內(nèi)壁與液面交界處輕輕研磨,使細(xì)菌均勻得散落在液體培養(yǎng)基中。

螺旋接種法:此法主要用于菌落總數(shù)計數(shù)
Spiral plater 可以在無任何全部或中間稀釋的情況下快速細(xì)菌接種。對數(shù)減少的樣品容量以阿基米德螺旋線的形式被自動分注在旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)基上每一點的容量可以被知曉和校準(zhǔn)。菌液的濃度可以通過培養(yǎng)皿上一定區(qū)域的菌落數(shù)量除以同區(qū)域樣品分注量來計算。
優(yōu)點:螺旋接種法菌液無需稀釋(其他接種方法均需經(jīng)過梯度稀釋才能計菌落數(shù)),自動化接種,效率高,可節(jié)省3/4的耗材和時間
缺點:產(chǎn)品成本高,適用于樣品量比較大的實驗

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